數字PCR儀用于運行病毒檢測實驗,并對實驗數據進行分析;儀器既可在實驗室內操作,又可用于野外科學實驗,配合相應試劑,對取自待檢測樣本的分析物或其他分析物中的目標核酸進行快速、準確的定性檢測。
數字PCR儀采用光、機、電一體化設計,配套具有自主知識產權的微流控芯片,可以將水相樣本快速制備成納升體積的液滴。液滴數與樣本體積相關,30微升樣本可制備約5萬個液滴。液滴尺寸均一,并可在PCR擴增后保持穩定。
應用領域:
1、基因表達
通常可通過數字PCR儀來檢測不同細胞類型、組織和生物體在特定時間點的基因表達差異。首先,從目標樣品中分離出RNA并將mRNA逆轉錄成cDNA。隨后,通過由PCR擴增的cDNA數量,確定mRNA的初始水平。這一過程也被稱為逆轉錄PCR,RT-PCR。
2、基因分型
PCR可用于檢測特定細胞或生物體中等位基因的序列差異。例如,基因敲除和敲入小鼠等轉基因生物的基因分型[3]。引物對經設計位于目標區域側翼,可根據是否存在擴增子及擴增子長度來檢測遺傳變異。
3、分子克隆
PCR被廣泛應用于目標DNA片段的克隆,該技術被稱為PCR克隆。在直接PCR克隆中,DNA(如,gDNA、cDNA、質粒DNA)的目標區域被擴增并插入到特殊設計的兼容載體中。
4、醫學、法醫學和應用科學
PCR技術不僅可用于基礎研究,還適用于日常的臨床診斷、法醫學調查和農業生物技術研究。這些應用要求可靠的性能、靈敏度和嚴格的標準。因此,所使用的數字PCR儀和PCR試劑必須符合這些要求和目的。